國立清華大學生物科技研究所/吳夙欽、洪偉立、林世昌

本技術適用於中國倉鼠卵巢(CHO)細胞等以提高重組蛋白質產量。本技術包含表現載體及核醣核酸干擾載體，表現載體含有哺乳動物之二氫葉酸還原酶(dhfr)基因及目標蛋白基因，核醣核酸干擾載體含有一段DNA序列，此DNA序列為CHO細胞及哺乳動物之dhfr基因片段，可在CHO細胞中引發RNA干擾來減低外源及內源性dhfr基因表現量。本技術為第一個利用核醣核酸干擾的原理，設計三個核醣核酸干擾載體，並且應用在提高哺乳動物細胞(例如CHO細胞)生產重組蛋白(例如抗體)。配合MTX/dhfr基因增幅法可以大幅提升高產量細胞純系的篩選，且不影響細胞在MTX/dhfr基因增幅時的存活率。使用核醣核酸干擾載體配合MTX/dhfr基因增幅法，可使細胞表現重組蛋白的穩定度增加。本技術提供一個核醣核酸抑制載體，可以產生RNA干擾，透過MTX/dhfr基因增幅後，可大大提升重組蛋白的產量，代表可以使生產成本下降1/2~1/3，而且不需要改變表現載體，此效益可使產品的價格降低而更被人們接受且使生產公司的獲利提高。